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常見的免疫檢測五大技術
點擊次數:366 發布時間:2018-01-17

(一)免疫酶染色試驗 (immunoenzyme staining test,IEST) 免疫酶染色試驗以含寄生蟲病原的組織切片、印片或培養物塗片為固相抗原,當其與待測標本中的特異性抗體結合後,可再與酶標記的第二抗體反應形成酶標記免疫複合物,後者可與酶的相應底物作用而出現肉眼或光鏡下可見的呈色反應。

(二)皮內試驗 (intrader rpmal test,ID) 宿主在病原體刺激後,體內產生親細胞性抗體(IgE和IgG4)。當其與相應抗原結合後,肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒,釋放生物活性物質,引起注射抗原的局部皮膚出現皮丘及紅暈,以此便可判斷體內是否某有種特異性抗體存在。

(三)免疫擴散(immunodiffusion)和免疫電泳(immunoelectrophoresis)

1.免疫擴散 於一定條件下,抗原與抗體在瓊脂凝膠中相遇,在二者含量比例合適時形成肉眼可見的白色沉澱。本法有兩種類型:①單相免疫擴散:將一定量的抗體混入瓊脂凝膠中,使抗原溶液在凝膠中擴散而形成沉澱環,其大小與抗原量成正比;②雙相免疫擴散:將抗原與抗體分別置於凝膠板的相對位置,二者可自由擴散並在中間形成沉澱線。用雙相免疫擴散法既可用已知抗原檢測未知抗體,也可用已知抗體檢測未知抗原。

2.免疫電泳 是將免疫擴散與蛋白質凝膠電泳相結合的一項技術。事先將抗原在凝膠板中電泳,之後在凝膠槽中加入相應抗體,抗原和抗體雙相擴散後,在比例合適的位置,產生肉眼可見的弧形沉澱線。


(四)酶聯免疫吸附試驗 (enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)

vvv 酶聯免疫吸附試驗原理是將抗原或抗體與底物(酶)結合,使其保持免疫反應和酶的活性。把標記的抗原或抗體與包被於固相載體上的配體結合,再使之與相應的無色底物作用而顯示顏色,根據顯色深淺程度目測或用酶標儀測定OD值判定結果。

(五)對流免疫電流試驗 (counter-immunoelectrophoresis,CIE) 對流免疫電泳試驗是以瓊脂或瓊脂糖凝膠為基質的一種快速,敏感的電泳技術。既可用已知抗原檢測抗體,又可用已知抗體檢測抗原。反應結果可信度高,適用範圍廣。以本法為基礎改進的技術有酶標記抗原對流免疫電泳(enzyme-linked antigen counterimmunoelectrophoresis,ELACIE )和放射對流免疫電泳自顯影(radio-immuno-counterelectrophoretic autography,RCIEPA)等技術。二者克服了電泳技術本身不夠靈敏的弱點。

(六)間接紅細胞凝集試驗(indirect haemagglutination test,IHA) 以紅細胞作為可溶性抗原的載體並使之致敏。致敏的紅細胞與特異性抗體結合而產生凝集,抗原與抗體間的特異性反應即由此而顯現。常用的紅細胞為綿羊或O型人紅細胞

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